WWW.KNIGI.KONFLIB.RU

БЕСПЛАТНАЯ ЭЛЕКТРОННАЯ БИБЛИОТЕКА

 
<< HOME
Научная библиотека
CONTACTS

Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 16 |

«Кафедра микробиологии МИКРОБИОЛОГИЯ Методические рекомендации к лабораторным занятиям, контроль самостоятельной работы студентов Для студентов биологического факультета ...»

-- [ Страница 1 ] --

БЕЛОРУССКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

БИОЛОГИЧЕСКИЙ ФАКУЛЬТЕТ

Кафедра микробиологии

МИКРОБИОЛОГИЯ

Методические рекомендации к лабораторным

занятиям, контроль самостоятельной работы

студентов

Для студентов биологического факультета

МИНСК

2002

УДК 579.8 + 579.232 + 579.06

ББК Авторы – составители:

В.В.Лысак, Р.А.Желдакова Рецензент кандидат биологических наук, доцент Титок М.А.

Микробиология: методические рекомендации к лабораторным занятиям и контроль самостоятельной работы студентов / Авт.-сост.

В.В.Лысак, Р.А.Желдакова. - Мн.: БГУ, 2002. - 100 с.

В учебно-методическом пособии приводятся рекомендации по выполнению лабораторных заданий по курсу «Микробиология», а также формы контроля самостоятельной работы студентов.

Предназначено для студентов 3-го курса дневного и 4-го курса заочного отделений биологического факультета специальностей G 31 01 01 «Биология» и Н 33 01 01 «Биоэкология».

УДК 579.8 + 579.232 + 579. ББК © БГУ,

1. ОСНАЩЕНИЕ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ

И ПРАВИЛА РАБОТЫ В НЕЙ

Микробиологические лаборатории обычно снабжены следующим оборудованием:

1. Биологическими иммерсионными микроскопами с дополнительными приспособлениями и наборами необходимых красителей.

2. рН-метрами, дистилляторами, центрифугами, техническими и аналитическими весами, аппаратурой для фильтрования и др.

3. Набором инструментов: бактериологическими петлями, микробиологическими шпателями, пинцетами, спиртовками и др.

4. Лабораторной посудой: пробирками, чашками Петри, флаконами, пипетками и др.

5. Приборами для стерилизации оборудования, питательных сред и реактивов.

6. Необходимыми средствами пожарной и химической безопасности (огнетушителями, дезинфицирующими растворами и т. д.).

Основное правило работы в микробиологической лаборатории – правильная организация работы. При этом следует придерживаться следующего:

1. К работе в лаборатории допускаются лица после прохождения инструктажа по технике безопасности.

2. Все должны работать в медицинских халатах. Вход без халата воспрещен.

3. В лаборатории запрещается курить и принимать пищу.

4. Рабочее место должно содержаться в образцовом порядке, а личные вещи храниться в специально отведенных местах.

5. При случайном попадании биологического материала на стол и т.

д. это место необходимо тщательно вытереть дезинфицирующим раствором.

6. Результаты работы следует заносить в рабочий журнал.

7. После окончания работы следует вымыть руки.

2. ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ

Известно значительное количество питательных сред, используемых для культивирования и поддержания (сохранения) микроорганизмов.

Питательной средой в микробиологии называют среды, содержащие различные соединения сложного или простого состава, которые применяются для размножения микроорганизмов в лабораторных или промышленных условиях. Еще в 1930 году их было классифицировано не менее двух тысяч наименований, но число ингредиентов, являющихся их неотъемлемыми компонентами, относительно невелико, а их композиции создаются на определенных общих принципах. Для размножения любых бактерий необходимо обеспечить подходящее биофизическое окружение и биохимические питательные компоненты. Любая питательная среда должна соответствовать следующим требованиям: содержать все необходимые для роста питательные вещества в легко усвояемой форме; иметь оптимальную влажность, вязкость, рН, быть изотоничной, сбалансированной с высокой буферной емкостью и, по возможности, прозрачной. Для роста автотрофных бактерий потребности в питательных веществах довольно просты: вода, двуокись углерода и соответствующие неорганические соли. Например, бактерии рода Nitrobacter ассимилируют СО2 и получают энергию путем окисления нитритов в нитраты. Гетеротрофные бактерии получают энергию в результате окисления (диссимиляции) восстановленных углеродных соединений.

Гетеротрофные бактерии используют органические соединения в двух целях: 1) в качестве источника энергии; при этом органическое вещество окисляется или расщепляется с высвобождением энергии и образованием ряда конечных продуктов типа СО2, органических кислот и др; 2) в качестве субстратов, ассимилируемых непосредственно с образованием клеточных компонентов или для их синтеза в реакциях, требующих затрат энергии. Так, E.coli способна к росту на простой среде, содержащей только глюкозу и неорганические соли.

Молочнокислые же бактерии растут на сложных средах, содержащих в качестве добавок ряд органических соединений (витамины, аминокислоты и др.), которые клетки не в состоянии синтезировать самостоятельно. Такие соединения называются факторами роста. Организмы, которые нуждаются в их добавлении к ростовой среде, называются ауксотрофными по соответствующим соединениям. Другая группа организмов, способная к росту на простых средах, содержащих источник углерода и энергии, а также набор основных биогенных элементов, получила название прототрофных. Следует учитывать и то, что в природе встречаются бактерии, которые способны размножаться в местах с низким пищевым потоком углерода – до 0,1 мг/л в день. Они получили название олиготрорфных, противоположную группу для них составляют бактерии копиотрофные – способные к росту на богатых пищевых субстратах.



Выбор питательной среды зависит в значительной степени от целей эксперимента, а существующая классификация питательных сред учитывает характеристику их следующих особенностей. По составу питательные среды делятся на натуральные и синтетические. Натуральными называют среды, которые состоят из продуктов растительного или животного происхождения, имеющих неопределенный химический состав. Примерами питательных сред такого типа являются среды, представляющие собой смесь продуктов распада белков (казеина, мышц млекопитающих), образующихся при их гидролизе. Кислотный (НСl) гидролиз белков используется для приготовления полных гидролизатов. Действие ферментов типа трипсина, панкреатина, папаина, приводит лишь к частичному (неполному) гидролизу белков, в результате чего образуются пептоны. Как правило, на пептонных питательных средах микроорганизмы растут лучше, чем на питательных средах, приготовленных из полных гидролизатов или смесей аминокислот. При ферментативном гидролизе, вероятно, сохраняются лабильные факторы роста. Кроме того, многие микроорганизмы лучше размножаются на средах, содержащих небольшие пептиды, потому что их они могут усваивать непосредственно, а отсутствующие аминокислоты – нет. Обычно в составе такой среды ферментативный гидролизат белка обеспечивает потребность в таких источниках азота, как аминокислоты, углеводы (глюкоза), используется как источник углерода и энергии, соли удовлетворяют потребности бактерий в неорганических ионах, а дрожжевой экстракт обеспечивает потребности в витаминах. К питательным средам неопределенного состава можно отнести и среды, полученные на основе растительного сырья: картофельный агар, томатный агар, отвары злаков, дрожжей, пивное сусло, настои сена и соломы и др. Основное назначение таких питательных сред – выделение, культивирование, получение биомассы и поддержание культур микроорганизмов.

К числу сред неопределенного состава относят и среды полусинтетические. В такую среду вносят известные соединения как явно необходимые; а также добавляют небольшое количество дрожжевого или кукурузного экстракта (или любого другого природного продукта) для обеспечения неизвестных потребностей роста. Такие среды часто используются в случае промышленного культивирования биологических объектов для получения продуктов метаболизма.

Синтетические среды – это среды определенного состава, представленные чистыми химическими соединениями, взятыми в точно указанных концентрациях и соотношениях отдельных элементов.

Обязательными компонентами таких сред являются неорганические соединения (соли) и углерод- и азотсодержащие вещества (типичными представителями являются глюкоза и (NH4)2SO4. Часто к таким средам добавляют буферные растворы и хелатирующие соединения. Ауксотрофные организмы растут на таких средах только при добавлении соответствующих факторов роста. Основное назначение таких питательных сред – изучение особенностей физиологии и метаболизма микроорганизмов, выделение генетических рекомбинантов и т. д.

По назначению среды разделяют на элективные и дифференциально-диагностические. Элективные среды обеспечивают преимущественное развитие одного или целой физиологической группы микроорганизмов. Например, для преимущественного выделения грамотрицательных бактерий бывает достаточным добавления в питательную среду трифенилметановых красителей (кристаллический фиолетовый, малахитовый зеленый и т. д.). Для выделения стафилоккоков в среду может быть добавлен хлористый натрий в концентрации 7,5 %.

При этой концентрации рост других бактерий подавляется. Элективные среды применяются на первом этапе выделения чистой культуры бактерий, т. е. при получении накопительной культуры.

Дифференциально-диагностические среды применяются для быстрой идентификации близкородственных видов микроорганизмов, для определения видовой принадлежности, в клинической бактериологии и др. Принцип построения дифференциально-диагностических сред основан на том, что разные виды бактерий различаются между собой по биохимической активности и имеют неодинаковый набор ферментов, расщепляющих субстраты, входящие в состав питательной среды.

В состав дифференциально-диагностической среды входят: а) основная питательная среда, обеспечивающая размножение бактерий;

б) определенный химический субстрат, отношение к которому является диагностическим признаком для данного микроорганизма; в) цветной индикатор, изменение окраски которого свидетельствует о биохимической реакции и наличии данной ферментной системы у исследуемого микроорганизма. Например, среда Эндо позволяет отличить клоны, сбраживающие лактозу от клонов, не обладающих этим свойством. Основными компонентами этой среды являются питательный (пептонный) агар, углевод и основной фусин, обесцвеченный сульфитом (реактив Шиффа). Исходная питательная среда окрашена в розовый цвет. Микроорганизмы, не сбраживающие лактозу, образуют бесцветные колонии. При сбраживании лактозы до ацетальдегида последний реагирует с сульфитом и развививается красная окраска соответствующих колоний. Среда с эозином и метиленовым синим (среда Левина) в качестве индикаторов содержит эозин и метиленовый синий и исходно окрашена в черно-синий цвет. Клетки, осуществляющие брожение, образуют колонии, окрашенные в черный с металлическим блеском цвет, а колонии, не обладающие этим свойством, бесцветны.

Подобные изменения окраски происходят потому, что красители присутствуют в среде не в виде самостоятельных соединений, а в виде комплексов с веществами питательной среды. При низких значениях рН эти комплексы выпадают в осадок, исходные же красители в этих условиях растворимы, при больших рН комплексы красителей бесцветны, тогда как метиленовый синий приобретает синюю окраску.

Данная среда позволяет дифференцировать бактерии рода Escherichia от бактерий рода Proteus.



Pages:     || 2 | 3 | 4 | 5 |   ...   | 16 |
 



Похожие работы:

«ГОДОВОЙ ОТЧЕТ за 2012 - 2013 учебный год г. Торжок 2013 СОДЕРЖАНИЕ Материально-техническая база 1. 3 Состав преподавателей, мастеров производственного обучения и лаборантов. Контингент студентов 5 Учебная и научно-методическая работа 3. 9 Производственное обучение 4. 20 Воспитательная работа 5. 24 Работа заочного отделения 6. 43 Гражданская оборона и охрана труда 7. 48 Работа общественных организаций 8. 50 Выводы и предложения 9. 51 2 1. МАТЕРИАЛЬНО-ТЕХНИЧЕСКАЯ БАЗА В течение учебного 2012-2013...»

«Принята Утверждаю решением Ученого совета университета Ректор ОмГТУ (протокол № 4 _ В.В. Шалай от 26 апреля 2013 г. 20 г. Основная образовательная программа высшего профессионального образования направления подготовки бакалавриата Энерго- и ресурсосберегающие процессы в химической технологии, нефтехимии и биотехнологии Квалификация – бакалавр Руководитель ООП, зав. кафедрой НХТ и О, д.т.н, профессор _Корнеев С.В. 20 г. Ответственный за методическое обеспечение ООП доцент, доцент /Давидан Г.М....»

«УТВЕРЖДЕНА Директором ИГНД НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКАЯ ПРЕДДИПЛОМНАЯ ПРАКТИКА Программа для направления 130100 Геология и разведка полезных ископаемых, магистерская программа 130100.27 Геология, поиски и разведка руд редких и радиоактивных элементов Институт геологии и нефтегазового дела Обеспечивающая кафедра: геоэкологии и геохимии (ГЭГХ) Курс 5 Семестр 10 Учебный план набора 2008 года с изменениями Распределение учебного времени Длительность практики 6 недель Дифзачет в 11 семестре 2008 264...»

«ПРОБЛЕМЫ УТИЛИЗАЦИИ ПОПУТНОГО НЕФТЯНОГО ГАЗА И ОПТИМАЛЬНЫЕ НАПРАВЛЕНИЯ ЕГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ Материалы XXIV Всероссийского межотраслевого совещания (Сочи, 6–7 октября 2010 г.) Краснодар 2011 УДК 665.632:622.276:622.279 В сборнике помещены материалы XXIV Всероссийского межотраслевого совещания-семинара по проблемам использования нефтяного газа и других видов лёгкого углеводородного сырья, проведенного ОАО НИПИгазпереработка в г. Сочи 6–7 октября 2010 г. Сборник подготовлен под редакцией Заслуженного...»

«Praha S T - N KA A ES V N L A L D T LT I T C NC E L E AU Y E H I K I RT R T К. Тесаржик, К.Комарек Капиллярные колонки в газовой хроматографии Перевод с чешского канд. хим. наук.. Гофмана под редакцией д-ра хим. наук, профессора В. Г. Березкина Москва Мир 1987 ББК 24.5 Т36 УДК 543.544 Тесаржик К-, Комарек К. Т36 Капиллярные колонки в газовой хроматографии: Пер. с чешек. — М.: Мир, 1987.—222 с, ил. Книга известных хроматографистов К. Тесаржика и К· Комарека (ЧССР) посвящена одному из...»

«ОБЩАЯ И НЕОРГАНИЧЕСКАЯ ХИМИЯ Учебно-методический комплекс по дисциплине для подготовки дипломированного специалиста по направлению 240000 Химическая и биотехнологии специальности 240406.65 Технология химической переработки древесины всех форм обучения Самостоятельное учебное электронное издание СЫКТЫВКАР 2012 1 УДК 54 ББК 24.1 О-28 Рекомендован к изданию в электронном виде кафедрой целлюлозно-бумажного производства, лесохимии и промышленной экологии Сыктывкарского лесного института Утвержден к...»

«Е.Г. ВЛАДИМИРОВА, Г.И. УШАКОВА, О.П. КУШНАРЁВА БИОХИМИЯ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ЛАБОРАТОРНОМУ ПРАКТИКУМУ Рекомендовано к изданию Редакционно-издательским советом государственного образовательного учреждения высшего профессионального образования Оренбургский государственный университет Оренбург 2004 ББК 28.072 В57 УДК 663 + 664.6/.7]: 577.112 Рецензент канд.техн.наук, доцент кафедры ТПП ОГУ Никифорова Т.А. Владимирова Е.Г., Ушакова Г.И., Кушнарева О.П. В57 Биохимия зерна, биохимия хлебопечения;...»

«УТВЕРЖДАЮ Проректор по развитию образования _Е.В.Сапир _2011 г. Рабочая программа дисциплины послевузовского профессионального образования (аспирантура) История и философия науки по специальности научных работников 03.01.05 Физиология и биохимия растений Ярославль 2011 2 Цели освоения дисциплины История и философия науки 1. Целью освоения дисциплины История и философия науки в соответствии с общими целями основной профессиональной образовательной программы послевузовского профессионального...»

«К.Г. Мелихов, А.М. Избяков Научная электронная библиотека eLibrary.ru Руководство пользователя Москва, 2003 ББК 78.38я7 Мелихов К.Г., Избяков А.М. Научная электронная библиотека eLibrary.ru: Руководство пользователя /РАН. Центр фотохимии. Самарский научный центр; ООО Интра-Центр+. – М.: Интра-Центр+, 2003. – 40 стр., илл. В руководстве приводится базовая информация о Научной электронной библиотеке eLibrary.ru и ее ресурсах, рассмотрены правила работы в библиотеке и алгоритм регистрации,...»






 
© 2013 www.knigi.konflib.ru - «Бесплатная электронная библиотека»

Материалы этого сайта размещены для ознакомления, все права принадлежат их авторам.
Если Вы не согласны с тем, что Ваш материал размещён на этом сайте, пожалуйста, напишите нам, мы в течении 1-2 рабочих дней удалим его.